Simple Westernによるマルチプレックスアッセイ
Simple Western™ テクノロジーでは、少量サンプルから複数ターゲットの発現データを取得するために、さまざまな手法を利用できます。従来のウェスタンブロッティングに比べ、少量のサンプル(例:3 µL)をより効率的に使え、複数のタンパク質ターゲットやアイソフォーム、サイズの違いを同時に分析できます。 以下に紹介する方法では、蛍光検出と化学発光検出の両方を活用し、タンパク質ノーマライゼーションを含めて1サンプルから最大限のデータポイントを取得しながら、最小限の作業時間で定量結果を取得できます。
マルチチャンネル検出 | RePlex: ストリッピングとリプロービングの自動化 | 最大4回の再サンプリング | マルチプレックスと総タンパク質ノーマライゼーション
マルチチャンネル検出
Simple Westernでは、ハンズオンはわずか1時間、ランも3時間という短時間で、高品質なサイズベースのデータを取得できます。1本のキャピラリーで、高感度化学発光およびNIR/IR蛍光チャンネルでのマルチプレックス分析が可能で、1サンプルから最大8つのターゲットを検出できます。
化学発光検出
Jess、Abby、Leoでは、高感度の化学発光検出により、分子量が重ならない複数ターゲットを同時に検出できるマルチプレックス ウェスタン分析が可能です。
NIR/IR蛍光検出
JessはNIR/IR蛍光検出を備えており、分子量が重なる複数ターゲットを複数チャンネルで同時に検出する多重蛍光ウェスタン分析が可能です。
RePlex: ストリッピングとリプロービングの自動化
Jess、Abby、LeoのRePlexモジュールを用いると、同一キャピラリー内でイムノアッセイを2回行います。これにより、サンプルを1回流すだけで複数ターゲットの測定結果をまとめて取得できます。
- リン酸化ターゲットと総(トータル)ターゲットアイソフォーム比の定量
- 同一キャピラリー内で測定した総タンパク質シグナルによるノーマライゼーション
- 免疫プローブの選択肢がさらに拡大
- サンプルあたりのデータポイントの増加
- 消耗品にかかる時間とコストの削減
最大4回の再サンプリング
Simple Western Leoは、同じサンプルを自動で再サンプリングして複数回測定できるため、実験効率を大幅に向上させます。別々のキャピラリーを用いて、1つのサンプルから複数ターゲットタンパク質の発現の有無や発現量を測定できます。Simple Western 装置の中で最も高いスループットを誇るLeoは、25-100本のキャピラリーを使用でき、1度のランで25-100サンプルを測定できます。さらに、1サンプルあたり最大8つのタンパク質を検出できます。 各サンプルは最大4回まで、別々のキャピラリーで再サンプリングおよび分析できます。同じサンプルから複数の分析を行えるため、サンプル消費量を抑えつつ、繰り返しのサンプル調製を最小限に抑え、効率的かつ自動化されたワークフローで、さまざまなターゲットタンパク質に対する正確な定量データが得られます。
RePlexモジュールと化学発光検出を用いたTPN
RePlexと化学発光検出を用いたTPNでは、RePlexで化学発光または蛍光によるイムノアッセイを実施した後、抗体を除去し、続いて総タンパク質を化学発光検出します。
RePlexモジュールとNIR蛍光検出を用いたTPN
RePlexとNIR蛍光検出によるTPNでは、RePlexで化学発光または蛍光によるイムノアッセイを実施した後、抗体を除去し、続いて総タンパク質をNIR蛍光検出します。
タンパク質ノーマライゼーション(PN)チャンネル
TPNは、タンパク質ノーマライゼーション (PN)チャンネルを用いて、化学発光、NIR、またはIR蛍光検出のイムノアッセイによる標的タンパク質の検出と、独立した蛍光チャンネルによる同一キャピラリー内での総タンパク質検出を同時に行います。
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