AAVのfull/empty比率をSimple Westernで定量する方法

AAVの完全粒子比率（full/empty比率）の定量は、品質評価において重要な指標です。
本アプリケーションノートでは、AAV（アデノ随伴ウイルス）粒子中のDNA含量を定量し、完全粒子の割合（Content Ratio）を評価する新規手法を、Simple Western™を用いて開発しました。Simple Westernは、キャピラリー電気泳動と免疫検出を組み合わせたキャピラリーウェスタン技術であり、従来のウェスタンブロッティングで使用される抗体を用いてタンパク質を測定できます。

本手法では、AAVサンプルをサイズまたは電荷に応じて自動的に分離した後、抗DNA抗体および抗VP1/2/3抗体を用いて、キャピラリー内でAAVの主要構成要素を特異的かつ高感度に検出します。これにより、各成分の量を定量的かつ高い再現性で測定することが可能です。

さらに、各抗体においてシグナル強度とサンプル量が直線的に相関する範囲を特定することで、AAVのfull/empty比率（Content Ratio:完全粒子の割合）を迅速かつ高感度に定量するアッセイを実現しました。