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RNAscope ISH 技术自动分析 - Leica

我们针对手动和自动方案开发了 RNAscope 原位杂交技术。如果您需要高通量或自动化解决方案,ACD 已与 Leica Biosystems 合作,共同提供 RNAscope ISH 自动分析。

我们针对 Leica 自动化 IHC ISH 平台,开发了 RNAscope 2.5 分析(有棕色、红色和多重三种规格可选)、RNAscope 2.5 LS 试剂盒、RNAscope LS 双重试剂盒、BaseScope 以及 miRNAscope 分析。

RNAscope 2.5 Leica 分析 - 棕色

经专门设计,可提供更强烈的二氨基联苯胺 (DAB) 染色。

适用于检测低拷贝数的靶基因表达(每个细胞中含 1-20 个拷贝)。

使用明场显微镜即可观察。

RNAscope 2.5 Leica 分析 - 红色

使用 Fast Red 染料,可获得更高的对比度。

红点在苏木精染色中能更清楚地显现。

使用标准明场显微镜即可观察。

BaseScope Leica 分析 - 红色

可检测短 RNA 靶标和外显子连接。

高对比度的 Fast Red 染料,在苏木精染色中能够更清楚地显现。

使用明场显微镜即可观察。

miRNAscope Leica 分析 - 红色

可检测小 RNA,包括检测 ASO、miRNA、siRNA 和较小 RNA(17-50 个碱基)。

miRNAscope LS 探针与 RNAscope LS 或 BaseScope LS 试剂不兼容。

RNAscope Leica 多重荧光分析

最多可使用四种靶向探针,同时检测多达四个 RNA 靶标。

四种靶向探针,为每种探针设计一个特定的探针通道 - C1、C2、C3 或 C4。

可使用 DAPI 荧光染料对细胞核进行反向染色和可视化。

RNAscope 2.5 Leica 双重分析

专门用于同时原位检测两种不同的 RNA。

通过探针通道 1 (C1, DAB) 和通道 2 (C2, Fast Red),可将两个靶标区分开来。

使用明场显微镜即可观察。

RNAscope 2.5 LSx 试剂盒 - 棕色

已预装试剂,可处理 60 张玻片。

试剂已预装到 Bond Rx 容器中,固定于两个托盘上;包含 Fast Red 色原、苏木精、上蓝剂和蛋白酶。

结果与现有 RNAscope 2.5 LS 分析的结果相当。

RNAscope 2.5 LSx 试剂盒 - 红色

已预装试剂,可处理 60 张玻片。

试剂已预装到 Bond Rx 容器中,固定于两个托盘上;包含 Fast Red 色原、苏木精、上蓝剂和蛋白酶。

结果与现有 RNAscope 2.5 LS 分析的结果相当。

Leica 自动分析

 

RNAscope 2.5 Leica 分析 - 棕色 

RNAscope 2.5 Leica 分析 - 红色 

RNAscope 2.5 Leica 双重分析 

RNAscope Leica 多重荧光分析 

BaseScope Leica 分析 - 红色 

miRNAscope Leica 分析 - 红色 

自动化系统

Leica BOND RX 系统

Leica BOND RX 系统

Leica BOND RX 系统

Leica BOND RX 系统

Leica BOND RX 系统

Leica BOND RX 系统

分析类型

显色

显色

显色

荧光

显色

显色

所用染料

二氨基联苯胺 (DAB)

Fast Red

DAB 和 Fast Red 可选择绿色和 Fast Red

基于酪酰胺信号放大 (TSA) 的 Opal 荧光团

Fast Red

Fast Red

多重分析

单重

单重

单重、双重

单重至四重

单重

单重

关键优势

稳定、灵敏、永久染色 应用最广泛的 RNAscope 分析

染料色彩明亮,与背景对比度高

同时原位检测两种不同的 RNA

采用 4 个不同的光谱通道,灵活性高

特异性检测剪接变异体/外显子连接和短靶标

稳定且特异性检测小 RNA

适用范围

高通量常规应用

适用于含有内源颜色背景的组织,如色素沉着的皮肤、肝或吸烟者的肺

共定位研究,定位两个靶标(例如,分泌配体及其受体)的共表达

同时分析最多 4 个基因的共定位研究及要求灵活性的实验

检测剪接变异体和外显子连接、短插入/缺失、复杂和高度同源基因家族的短靶标

检测小 RNA,包括 ASO、miRNA、piRNA、shRNA、siRNA 和 tRNA

新基因或未知表达

兼容

兼容

兼容

兼容

兼容

兼容

归档样本

兼容

兼容

兼容

兼容

兼容

兼容

显微镜成像系统

标准明场

标准明场

标准明场

多光谱荧光成像

标准明场

标准明场

样本类型

FFPE 固定冰冻组织 新鲜冰冻组织 培养细胞

FFPE 固定冰冻组织 新鲜冰冻组织 培养细胞

FFPE 固定冰冻组织 新鲜冰冻组织 培养细胞

FFPE 组织 (TMA) 固定冰冻组织 新鲜冷冻组织 培养细胞

FFPE 新鲜冰冻组织 培养细胞

FFPE 固定冷冻组织 新鲜冰冻组织 培养细胞

定量方法

目视检查 HALO® 软件 任何开源图像分析软件

目视检查 HALO® 软件 任何开源图像分析软件

目视检查 HALO® 软件 任何开源图像分析软件

目视检查 HALO® 软件 任何开源图像分析软件

目视检查 HALO® 软件 任何开源图像分析软件

目视检查 HALO® 软件 任何开源图像分析软件

每个试剂盒可处理的组织切片数量

60 张(面积:20 mm x 20 mm)

60 张(面积:20 mm x 20 mm)

60 张(面积:20 mm x 20 mm)

60 张(面积:20 mm x 20 mm)

60 张(面积:20 mm x 20 mm)

60 张(面积:20 mm x 20 mm)

要求的靶序列长度

300-1000bp

300-1000bp

300-1000bp

300-1000bp

50-300bp

17-50bp