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同型对照抗体的定义

Bio-Techne offers a wide variety of isotype control options that cover multiple species, isoforms and conjugates to match primary antibodies.

同型对照抗体通常用作阴性对照。免疫分析利用免疫球蛋白检测特定的分析物。然而,这些免疫球蛋白也可以与非靶抗原细胞蛋白结合,从而产生非特异性信号。此外,免疫分析中使用的细胞和组织可呈现自然荧光。为了区分特异性信号和背景染色,无论是由于非特异性结合还是自发荧光,同型抗体均可用作实验对照。同型对照是与一抗的物种、同型和偶联相匹配的抗体,但对分析的样本类型中未发现的分析物具有特异性,如钥孔血蓝蛋白 (KLH) 和鸡蛋溶菌酶 (HEL)。同型对照提供的方法可测量背景染色并可提示是否需要进一步实验优化。

选择正确的同型对照抗体

需要有适当的同型对照抗体才能正确解释实验结果。同型对照抗体和一抗所具备的以下特征应尽可能匹配。

  • 抗体物种 一抗和同型对照抗体应来自相同的宿主物种。  
  • 抗体类别和子类别 一抗和同型对照抗体应属于相同类别和子类别,以便其具有相同的重链。  
  • 偶联 同型对照抗体和一抗应具有相同的偶联。如果一抗未偶联,应使用未偶联的同型对照抗体。同样,如果一抗已偶联,则同型抗体应与相同标签结合。
Isotype Control Selection

同型对照抗体的应用

R&D Systems CXCR4 antibody was used to detect CXCR4 in the Jurkat human acute T cell leukemia cell line.

通过流式细胞术检测 Jurkat 人急性 T 细胞白血病细胞系中的 CXCR4。

同型对照抗体多用于流式细胞术实验。在流式细胞术中,抗体与表面可结晶片段受体非特异性结合,产生背景染色,这可能会混淆结果。在分析罕见细胞群或低表达蛋白时,或在构建流式细胞术多色组合时,背景染色的干扰性尤其强烈。使用与一抗的物种、类别、偶联以及浓度相匹配的同型对照抗体,可以区分特异性信号和非特异性背景染色。同型对照抗体还可以作为阻断剂和蛋白涂层用于作其它应用,包括酶联免疫吸附测定法、Western blot、免疫组织化学法和免疫细胞化学法。

Novus Biologicals™ 同型对照抗体

Novus Biologicals 是 Bio-Techne 的品牌,提供了大量同型对照抗体产品组合。访问 Novus 网站,查看精选同型对照抗体。

wide-range of antibodies

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