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RNAscope ISH 手动分析

手动 RNAscope ISH 分析使用一种新型、专有的显色原位杂交 (ISH) 方法,在单个细胞水平上可视化单个 RNA 分子,从空间上对其进行检测,同时维持空间组织微环境。RNAscope ISH 手动分析包括 3 款显色分析和 3 款荧光分析。

RNAscope 2.5 HD 分析 - 棕色

高度灵敏的 RNA ISH 方法,用于检测低表达基因靶标。

稳定、可靠的检测,非常适合首次操作的用户。

可对低拷贝靶标(每个细胞中含 1-20 个拷贝)进行强烈的 DAB 染色。

使用标准明场显微镜即可观察。

RNAscope 2.5 HD 分析 - 红色

在 DAB 染色不佳时,Fast Red 染料可提供高对比度染色。

红点在苏木精染色中能更清楚地显现。

使用标准明场显微镜即可观察。

RNAscope 2.5 HD 双重分析

能够在单细胞分辨率下同时检测两个 RNA 靶标。

使用基于 HRP 的绿色色原和基于 AP 的 Fast RED 色原。

永久染色,非常适合归档样本,使用明场显微镜即可观察。

显色 RNAscope ISH 技术分析表格:

查看下表,详细了解哪款手动显色 RNA ISH 产品可满足您的研究需求。

*福尔马林固定、石蜡包埋 (FFPE)、组织微阵列 (TMA)

 

RNAscope 2.5 HD 分析 - 棕色

RNAscope 2.5 HD 分析 - 红色

RNAscope 2.5 HD 双重分析

RNAscope 多重荧光分析

提供两款试剂盒 - 详情请参见此处

分析类型

显色

显色

显色

荧光

所用染料

二氨基联苯胺 (DAB)

Fast Red

HRP 绿色和 Fast Red

基于酪酰胺信号放大 (TSA) 的 Opal 荧光团

RNAscope 探针指定通道

通道 1 (C1 探针)

通道 1 (C1 探针)

通道 1 和 2 (C1 和 C2 探针)

通道 1-4 (C1、C2、C3 和 C4 探针)

多重分析

单重

单重

单重、双重

单重至四重

关键优势

稳定、灵敏、永久染色。使用最广泛的 RNAscope 分析

染料色彩明亮,与背景对比度高

使用 2 种不同的染色酶,因此可避免两种染色剂之间的任何串扰

采用 4 个不同的光谱通道,灵活性高

适用范围

用户首次操作,常规应用

适用于含有内源颜色背景的组织,如色素沉着的皮肤、肝或吸烟者的肺

同时研究两种 RNA 生物标志物

同时分析最多 4 个基因的共定位研究及要求灵活性的实验

新基因或未知表达

兼容

兼容

兼容

兼容

归档样本

兼容

兼容

兼容

兼容

显微镜成像系统

标准明场

标准明场 多光谱荧光成像

标准明场

多光谱荧光成像

样本类型*

FFPE 组织 (TMA) 固定冰冻组织 新鲜冰冻组织 培养细胞

FFPE 组织 (TMA) 固定冰冻组织 新鲜冰冻组织 培养细胞

FFPE 组织 (TMA) 固定冰冻组织 新鲜冰冻组织 培养细胞

FFPE 组织 (TMA) 固定冰冻组织 新鲜冰冻组织 培养细胞

荧光 RNAscope ISH 分析

RNAscope HiPlex 分析

同时检测多达 12 个不同的 RNA 靶标。

在空间背景下验证单细胞内的基因标记。

快速荧光团切割可确保对 RNA 或组织形态的影响最小/无影响。

使用 RNAscope HiPlex 注册软件合并荧光团图像。

RNAscope 多重荧光 V2 分析

同时检测多达 4 个靶标。

获得专利的 ISH 信号放大技术,将应用扩展到 FFPE 样本和 ISH-IHC 工作流程。

使用序贯分析工作流程以及 Opal 染料和酪酰胺信号放大技术(TSA™,Akoya Biosciences),灵活进行可视化。

RNAscope 荧光多重分析

专利信号放大和背景抑制技术。

新型、专有的 ISH 方法,可在单细胞分辨率下检测 RNA。

可在一份样本中同时检测 3 个 RNA 靶标。

使用 FITC、Cy3 和 Cy5 染料进行检测。

荧光 RNAscope ISH 技术分析表格:

查看下表,详细了解哪款手动荧光 RNA 原位杂交产品可满足您的研究需求。

 

RNAscope HiPlex

RNAscope 多重荧光 v2

RNAscope 荧光多重

提供的靶标检测重数

配合使用 RNAscope 12 重辅助试剂盒,可实现 12 重检测能力

(目录编号 324140)*

配合使用适用于多重荧光 v2 的 RNAscope 4 重辅助试剂盒,可实现 4 重检测能力

(目录编号 323120)*

3 重检测能力

适用的样本制备方式

新鲜冰冻、固定冰冻

FFPE、固定冰冻(低表达子)**细胞和新鲜冰冻

(如果是高度自发荧光的样本)

新鲜冰冻、细胞、固定冰冻

(高表达子)

需要的其他产品

Opal 染料必须从 Akoya Biosciences 购买。

工作流程时长

9 小时(建议分 3 天进行)

14 小时(建议分 2 天进行)

6-8 小时

使用/推荐的荧光团

检测试剂盒(荧光试剂)中提供的 Alexa Fluor-488、Atto-550、Atto-647N、Alexa Fluor-750 荧光团

购自 Akoya Biosciences: 3 重: Opal™ 520 试剂包(目录编号:FP1487001KT) Opal™ 570 试剂包(目录编号:FP1488001KT) Opal™ 690 试剂包(目录编号:FP1497001KT)   4 重: Opal™ 520 试剂包(目录编号:FP1487001KT) Opal™ 570 试剂包(目录编号:FP1488001KT) Opal™ 620 试剂包(目录编号:FP1495001KT) Opal™ 690 试剂包(目录编号:FP1497001KT)

检测试剂盒 (Amp 4) 中提供的 Alexa Fluor-488、Atto-550 和 Atto-647N 荧光团

可切割荧光团

ISH-IF 兼容性

兼容

兼容:请参阅编号为 323100-TN 的文档

不推荐

推荐用于

自发荧光较低的组织

自发荧光较高的组织

自发荧光较低的组织

探针指定

RNAscope HiPlex 探针:T1、T2、T3、T4、……T12

RNAscope 探针:C1、C2、C3、C4

RNAscope 探针:C1、C2、C3

推荐的荧光显微镜滤光片组:

Ex Max 358 nm/Em Max 461 nm (DAPI) Ex Max 494 nm/Em Max 517 nm (FITC) Ex Max 550 nm/Em Max 570 nm (Cy3) Ex Max 648 nm/Em Max 667 nm (Cy5) Ex Max 753 nm/Em Max 777 nm (Cy7)

Ex Max 358 nm/Em Max 461 nm (DAPI) Ex Max 494 nm/Em Max 525 nm (FITC) Ex Max 550 nm/Em Max 570 nm (Cy3) Ex Max 588nm/Em Max 616 nm (Tx Red) Ex Max 676 nm/Em Max 694 nm (Cy5.5)

Ex Max 358 nm/Em Max 461 nm (DAPI) Ex Max 494 nm/Em Max 517 nm (FITC) Ex Max 550 nm/Em Max 570 nm (Cy3) Ex Max 648 nm/Em Max 667 nm (Cy5)

封片剂

Prolong Gold

Prolong Gold

Prolong Gold

目录编号

324100

323100

320850

说明

RNAscope 荧光多重试剂盒采用 ACD 专有的扩大策略设计而成。该分析使用 Alexa Fluor-488、Atto-550、Atto-647N 和 Alexa Fluor-750,可在同一组织切片上检测多达 12 个靶标。

基于 TSA 的荧光 RNAscope 检测分析,使用 Opal 荧光团(单独销售),最多可进行 4 重检测。非常适用于 FFPE 组织

RNAscope 荧光多重试剂盒采用 Alexa Fluor-488、Atto-550 和 Atto-647N 荧光团,最多可进行 3 重检测。

研究领域

神经科学

免疫肿瘤学(CD8、PD1、PDL1)、肿瘤学、神经科学

神经科学